Mit der Fluorescence Life-time Microscopy lassen sich über punktweisen Messung der Fluoreszenzlebensdauer Informationen über den pH-Wert oder der Sauerstoffkonzentration innerhalb biologischer Proben gewinnen.
Zur Messung der Fluoreszenzlebensdauer wird der Auftreffzeitpunkt eines Photones auf den Detektor in Pikosekundenauflösung registriert. Durch Messung vieler Ereignisse kann über eine statistische Auswertung die exponentielle Abklingkurve bestimmt werden, welche für jedes Molekül spezifisch ist.